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流式细胞仪荧光染料怎么选?

发布日期:2022-06-09 发布人员: 浏览次数:43

       荧光染料是指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质。它们大多是含有苯环或杂环并带有共轭双键的化合物。由于灵敏度高,操作方便,逐渐取代了放射性同位素作为检测标记,其广泛应用于荧光免疫,荧光探针,细胞染色等。

       染料或单抗所标记的荧光素必须考虑仪器所配置的激光光源的波长,即染料的激发光谱;仪器激光的激发光波长尽可能接近荧光染料的激发光谱峰值;此外,还要考虑荧光染料的发光颜色,即染料的发射光谱,需选择合适波段的检测器检测相应的荧光信号。

       由于现在的流式细胞仪都装有多个荧光信号检测器,仪器在同时检测多种荧光时,每个荧光检测器只允许一种指定波长的荧光信号进入并被检测,因此使用者必须选用适当的荧光信号接收器,才能收到最佳的信号。还要注意使用由同一波长激光的荧光染料,其发射波长不同,才可以用相应波段的检测器接收,达到同时检测的目的。

       流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置,在测定时需要使用荧光染料,具体该如何选择?

       荧光染料多种多样,由于他们的分子结构不同,其荧光激发谱与发射谱也各异。选择

荧光染料激发波长
发射波长
用途
FITC488nm
525nm免疫标记
PE(RD1)488nm575nm免疫标记
ECD488nm610nm免疫标记
PE-CY5488nm675nm免疫标记
PI488nm620nmDNA分析
7AAD488nm675nm区分死细胞


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